ITC: Messung: Unterschied zwischen den Versionen

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Bevor die teuer synthetisierten Substanzen vermessen werden, lohnt es sich, mit bekannten Systemen zu üben!
{{:ITC Übersichtsmenü}}
z.B. Wasser / Wasser, 2.5 % Methanol / Wasser, CaCl<sub>2</sub> / EDTA (in 200 mm Natriumacetatpuffer pH 5.5)


=== 1. Computer einschalten und einloggen. ===


'''Achtung:''' Bevor die teuer synthetisierten Substanzen vermessen werden, lohnt es sich, mit bekannten Systemen zu üben!
z.B. Wasser / Wasser, 2.5 % Methanol / Wasser, CaCl<sub>2</sub> / EDTA (in 200 mm Natriumacetatpuffer pH 5.5)


=== 2. ITC einschalten ===
=== Computer einschalten und einloggen. ===


Orangenes Lämpchen sollte leuchten, rot und grün wäre fehlerhaft.


=== ITC einschalten ===


=== 3. Das Programm VPViewer starten ===
* Orangenes Lämpchen sollte leuchten
* rot und grün wäre fehlerhaft.
 
 
=== Das Programm VPViewer starten ===
   
   
  Falls zu diesem oder einem späteren Zeitpunkt die Fehlermeldung erscheint, dass der Injektor nicht gefunden wird:
  Falls zu diesem oder einem späteren Zeitpunkt die Fehlermeldung erscheint, dass der Injektor nicht gefunden wird:
  mit dem großen Schraubenzieher (HEX Driver 7/64) in das gekennzeichnete Loch (Reset) oben am Gerät drücken und so den Injektor neu starten.  
  mit dem großen Schraubenzieher (HEX Driver 7/64) in das gekennzeichnete Loch (Reset) oben am Gerät drücken und so den Injektor neu starten.  


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Anschließend auf der VPViewer Oberfläche Doppleklick auf Temp(°C) und über System den Menüpunkt Hardware öffnen.
Nach anklicken von Init. RS-232 sollte das Problem behoben sein. (Siehe Screenshots)


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Anschließend auf der VPViewer Oberfläche Doppleklick auf Temp(°C) und über System den Menüpunkt Hardware öffnen. Nach anklicken von Init. RS-232 sollte das Problem behoben sein. (Siehe Screenshots)
Ein Neustart des Programms führt aber auch zum Ziel!
=== 4. Temperatur einstellen ===


Das Einstellen der Temperatur erfolgt unter Thermostat/Calib, durch Doppelklick auf Thermostat Control kann auch die Shield Temp manuell verstellt werden (siehe Screenshots). Die gewählte Temperatur sollte höher sein als die Außentemperatur, da das Gerät über keine Kühlung verfügt. Im Normalfall ist 1°C Differenz zwischen der Jacket und der Shield Temp empfehlenswert. Soll bei Temperaturen unter Raumtemperatur gemessen werden, sollte die Shield Temp deutlich geringer als die Jacket Temp eingestellt werden. Das Einregeln der Temperatur kann einige Zeit dauern, gemessen werden sollte erst, wenn DT(°C) konstant bei Null steht.
* Ein Neustart des Programms führt aber auch zum Ziel!




=== Temperatur einstellen ===


* Das Einstellen der Temperatur erfolgt unter Thermostat/Calib
* durch Doppelklick auf Thermostat Control kann auch die Shield Temp manuell verstellt werden (siehe Screenshots).
* Die gewählte Temperatur sollte höher sein als die Außentemperatur, da das Gerät über keine Kühlung verfügt.
* Im Normalfall ist 1°C Differenz zwischen der Jacket und der Shield Temp empfehlenswert.
* Soll bei Temperaturen unter Raumtemperatur gemessen werden, sollte die Shield Temp deutlich geringer als die Jacket Temp eingestellt werden.
* Das Einregeln der Temperatur kann einige Zeit dauern, gemessen werden sollte erst, wenn DT(°C) konstant bei Null steht.


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=== 5. Unter Setup/Maintenance den Current User auswählen. ===


=== Unter Setup/Maintenance den Current User auswählen. ===




=== 6. Zellen befüllen ===


=== Zellen befüllen ===


Mit der Spritze ca. 2 mL aufziehen (das Zellvolumen beträgt 1.8 mL) Spritze einführen, bis der Boden berührt wird, wieder leicht vom Boden anheben, befüllen bis der Flüssigkeitsspiegel sichtbar wird, Spritze leicht bewegen, um Bläschen zu vertreiben, Spritze fast komplett herausziehen, das von der Kanüle eingenommene Volumen nachspritzen.
* Mit der Spritze ca. 2 mL aufziehen (das Zellvolumen beträgt 1.8 mL).
* Spritze einführen, bis der Boden berührt wird.
* wieder leicht vom Boden anheben, befüllen bis der Flüssigkeitsspiegel sichtbar wird.
* Spritze leicht bewegen, um Bläschen zu vertreiben.
* Spritze fast komplett herausziehen.
* das von der Kanüle eingenommene Volumen nachspritzen.


Die Reference Cell wird mit dem Lösungsmittel befüllt, vor dem Befüllen mit dem Reference Plug (im Koffer) den kleinen Nubsi auf der Zelle entfernen, nach dem Spülen und Befüllen, den Nubsi wieder aufsetzen. Die Sample Cell wird für Referenzmessungen nur mit Lösungsmittel, für die tatsächlichen Messungen mit der Ligandenlösung befüllt.
* Die Reference Cell wird mit dem Lösungsmittel befüllt.
* vor dem Befüllen mit dem Reference Plug (im Koffer) den kleinen Nubsi auf der Zelle entfernen.
* nach dem Spülen und Befüllen, den Nubsi wieder aufsetzen.  
* Die Sample Cell wird für Referenzmessungen nur mit Lösungsmittel, für die tatsächlichen Messungen mit der Ligandenlösung befüllt.




=== 7. Injektionsspritze befüllen ===
=== Injektionsspritze befüllen ===


* Injektionsspritze in eines der im Thermovac vortemperierten Röhrchen tauchen.  
* Injektionsspritze in eines der im Thermovac vortemperierten Röhrchen tauchen.  
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8. Injektionsspritze in das Gerät einsetzen.
=== Injektionsspritze in das Gerät einsetzen. ===
 
 
=== Projekt benennen ===
 
Bei ITC Control unter Data File Name wird das Projekt benannt und bei Available Titrant können Kommentare hinzugefügt werden.
 
 
=== Parameter definieren ===
 
Bei den Experimental Parameters gilt als Faustregel, dass die Reference Power einen Wert von 10 zugewiesen bekommen sollte. Die Injection Parameters lassen sich auch während der Messung verändern, Update Parameter nicht vergessen!
 
 
=== Start! ===




9. Bei ITC Control unter Data File Name wird das Projekt benannt und bei Available Titrant 
=== Baseline Equilibration ===
    können Kommentare hinzugefügt werden.


* Das Programm beginnt mit der Baseline Equilibration
* sollte diese länger als eine halbe Stunde dauern, kann die Messung abgebrochen werden, dann wird das nix!


10. Parameter definieren Bei den Experimental Parameters gilt als Faustregel, dass die
Referece Power einen Wert von 10 zugewiesen bekommen
sollte.
      Die Injection Parameters lassen sich auch während der Messung
  verändern, Update Parameter nicht vergessen!


=== Ende der Messung ===


11. Start!
* Nach dem Ende der Messung die Injektionsspritze entfernen
* durch Klicken auf Purge>Refill entleeren.




12. Das Programm beginnt mit der Baseline Equilibration, sollte diese länger als ½ Stunde
=== Säubern der Sample Cell ===
      dauern kann die Messung abgebrochen werden, dann wird das nix!


* Das Saugflaschen Konglomerat anschließen (also den grünen Stopfen auf die Saugflasche, die Injektionsnadel in die Messzelle, die Schläuche ans Vakuum und an die Injektionsspritze oder direkt in die Spülflüssigkeit)
* Falls durch die Injektionsspritze gespült werden soll, den Fillport öffnen
* Vakuum anlegen und Spülen


13. Nach dem Ende der Messung die Injektionsspritze entfernen und durch Klicken auf
      Purge>Refill entleeren.


=== Säubern der Reference Cell ===


* Das Säubern der Reference Cell muss manuell mit der Spritze erledigt werden
* 10-15 Mal durchspülen ist empfehlenswert.


14. Säubern der Sample Cell  Das Saugflaschen Konglomerat anschließen (also den grünen
    Stopfen auf die Saugflasche, die Injektionsnadel in die
    Messzelle, die Schläuche ans Vakuum und an die
    Injektionsspritze oder direkt in die Spülflüssigkeit)
            Falls durch die Injektionsspritze gespült werden soll den
      Fillport öffnen
            Vakuum anlegen und Spülen


15. Das Säubern der Reference Cell muss manuell mit der Spritze erledigt werden, 10-15 Mal
=== Aufbewahrung der Zellen ===
      Durchspülen ist empfehlenswert.


16. Die Zellen mit Wasser befüllt lassen und nicht vergessen den Deckel aufzusetzen.
* Die Zellen mit Wasser befüllt lassen
* nicht vergessen, den Deckel aufzusetzen.




[[Kategorie:Laborgeräte-Anleitung]]
[[Kategorie:Laborgeräte-Anleitung]]
[[Kategorie:Anleitung]]

Aktuelle Version vom 19. Januar 2022, 11:39 Uhr

ITC: Übersichtsmenü


Achtung: Bevor die teuer synthetisierten Substanzen vermessen werden, lohnt es sich, mit bekannten Systemen zu üben!
z.B. Wasser / Wasser, 2.5 % Methanol / Wasser, CaCl2 / EDTA (in 200 mm Natriumacetatpuffer pH 5.5)

Computer einschalten und einloggen.

ITC einschalten

  • Orangenes Lämpchen sollte leuchten
  • rot und grün wäre fehlerhaft.


Das Programm VPViewer starten

Falls zu diesem oder einem späteren Zeitpunkt die Fehlermeldung erscheint, dass der Injektor nicht gefunden wird:
mit dem großen Schraubenzieher (HEX Driver 7/64) in das gekennzeichnete Loch (Reset) oben am Gerät drücken und so den Injektor neu starten.

Itc12.png 

Anschließend auf der VPViewer Oberfläche Doppleklick auf Temp(°C) und über System den Menüpunkt Hardware öffnen.
Nach anklicken von Init. RS-232 sollte das Problem behoben sein. (Siehe Screenshots)

Itc13.png Itc14.png


  • Ein Neustart des Programms führt aber auch zum Ziel!


Temperatur einstellen

  • Das Einstellen der Temperatur erfolgt unter Thermostat/Calib
  • durch Doppelklick auf Thermostat Control kann auch die Shield Temp manuell verstellt werden (siehe Screenshots).
  • Die gewählte Temperatur sollte höher sein als die Außentemperatur, da das Gerät über keine Kühlung verfügt.
  • Im Normalfall ist 1°C Differenz zwischen der Jacket und der Shield Temp empfehlenswert.
  • Soll bei Temperaturen unter Raumtemperatur gemessen werden, sollte die Shield Temp deutlich geringer als die Jacket Temp eingestellt werden.
  • Das Einregeln der Temperatur kann einige Zeit dauern, gemessen werden sollte erst, wenn DT(°C) konstant bei Null steht.

Itc15.png Itc16.png


Unter Setup/Maintenance den Current User auswählen.

Zellen befüllen

  • Mit der Spritze ca. 2 mL aufziehen (das Zellvolumen beträgt 1.8 mL).
  • Spritze einführen, bis der Boden berührt wird.
  • wieder leicht vom Boden anheben, befüllen bis der Flüssigkeitsspiegel sichtbar wird.
  • Spritze leicht bewegen, um Bläschen zu vertreiben.
  • Spritze fast komplett herausziehen.
  • das von der Kanüle eingenommene Volumen nachspritzen.
  • Die Reference Cell wird mit dem Lösungsmittel befüllt.
  • vor dem Befüllen mit dem Reference Plug (im Koffer) den kleinen Nubsi auf der Zelle entfernen.
  • nach dem Spülen und Befüllen, den Nubsi wieder aufsetzen.
  • Die Sample Cell wird für Referenzmessungen nur mit Lösungsmittel, für die tatsächlichen Messungen mit der Ligandenlösung befüllt.


Injektionsspritze befüllen

  • Injektionsspritze in eines der im Thermovac vortemperierten Röhrchen tauchen.
  • Unter ITC Control den Fillport auf open stellen.
  • Die Spritze mit dem Schlauch anbauen, und soviel Volumen aufziehen, bis ein bisschen Lösung in den Schlauch gezogen wurde.
  • Auf Close Fillport klicken.
  • Den Schlauch wieder abnehmen.
  • Durch klicken auf Purge>Refill die Spritze wiederbefüllen.
  • diesen Vorgang zweimal wiederholen (kann ein bisschen dauern, ready und busy geben den Status an).


Injektionsspritze in das Gerät einsetzen.

Projekt benennen

Bei ITC Control unter Data File Name wird das Projekt benannt und bei Available Titrant können Kommentare hinzugefügt werden.


Parameter definieren

Bei den Experimental Parameters gilt als Faustregel, dass die Reference Power einen Wert von 10 zugewiesen bekommen sollte. Die Injection Parameters lassen sich auch während der Messung verändern, Update Parameter nicht vergessen!


Start!

Baseline Equilibration

  • Das Programm beginnt mit der Baseline Equilibration
  • sollte diese länger als eine halbe Stunde dauern, kann die Messung abgebrochen werden, dann wird das nix!


Ende der Messung

  • Nach dem Ende der Messung die Injektionsspritze entfernen
  • durch Klicken auf Purge>Refill entleeren.


Säubern der Sample Cell

  • Das Saugflaschen Konglomerat anschließen (also den grünen Stopfen auf die Saugflasche, die Injektionsnadel in die Messzelle, die Schläuche ans Vakuum und an die Injektionsspritze oder direkt in die Spülflüssigkeit)
  • Falls durch die Injektionsspritze gespült werden soll, den Fillport öffnen
  • Vakuum anlegen und Spülen


Säubern der Reference Cell

  • Das Säubern der Reference Cell muss manuell mit der Spritze erledigt werden
  • 10-15 Mal durchspülen ist empfehlenswert.


Aufbewahrung der Zellen

  • Die Zellen mit Wasser befüllt lassen
  • nicht vergessen, den Deckel aufzusetzen.
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